Docente
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PICCHIETTI Simona
(programma)
La microscopia ottica: principi e applicazioni. Le tecniche cito-istologiche come metodo diagnostico. Metodi di indagine istochimica. La microscopia ottica a microdissezione laser: principi di funzionamento e applicazioni in diversi ambiti di ricerca. Tecniche di immunoistochimica ed immunofluorescenza su cellule e tessuti: possibili applicazioni in ambito biologico e in particolare nella ricerca biomedica di base ed applicata. Gli anticorpi e le immunolocalizzazioni. Fluorescenza e fluorocromi. Le proteine fluorescenti. Il microscopio a fluorescenza e il microscopio a scansione laser confocale; principi di preservazione dei campioni per la microscopia confocale. Microscopia a due fotoni. Microscopia a super-risoluzione: principi ed applicazioni. Procedure per l’ibridazione in situ su cellule e sezioni di tessuti: principi generali ed applicazioni. La microscopia elettronica: principi di funzionamento ed applicazioni in ambito diagnostico. Il microscopio elettronico a trasmissione e a scansione: tecniche di preparazione dei campioni. Microanalisi elementare del campione (SEM-EDS): presentazione e discussione di casi studio. Il microscopio elettronico a scansione ambientale principi ed applicazioni. L’immunogold labelling e sue applicazioni in ambito biomedico. Microscopia per le nanotecnologie. Il microscopio a forza atomica: principi e applicazioni in ambito farmacologico. Discussione di lavori scientifici in lingua inglese riguardanti le tematiche e gli approcci metodologici affrontati durante il corso. Descrizione sintetica delle attività di laboratorio Allestimento di vetrini istologici: fissazione, inclusione, taglio al microtomo, colorazione ed osservazione al microscopio ottico. Reazioni di immunolocalizzazione: la tecnica ABC immunoperossidasi. Preparazione di campioni per la microscopia a fluorescenza: osservazione di campioni al microscopio a fluorescenza e al microscopio a scansione laser confocale. Microdissezione laser di campioni biologici. Preparazione di campioni per la microscopia elettronica a trasmissione: fissazione, inclusione, taglio all’ultramicrotomo, contrasto positivo ed analisi al TEM. Contrasto negativo di campioni biologici. Reazioni di immunolocalizzazione per la microscopia elettronica: preparazione ed osservazione di campioni. Il microscopio elettronico a scansione: preparazione di campioni ed osservazione. Microanalisi elementare del campione: preparazione ed osservazione di campioni. Le esercitazioni verranno svolte presso il laboratorio di zoologia e nei laboratori del CGA.
(testi)
Articoli scientifici in inglese e slides delle lezioni. https://www.unitus.it/it/unitus/Studenti/articolo/moodle
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