Docente
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CARUSO Carla
(programma)
Elementi di Ingegneria proteica (2 CFU) Espressione di proteine ricombinanti nei sistemi procariotici: principi ed applicazioni Espressione di proteine ricombinanti nei sistemi eucariotici: -Espressione in Saccharomyces cerevisiae e Pichia pastoris; -Espressione in piante.
Esercitazioni (1 CFU) • Digestione del plasmide pGEM-HEL e purificazione di HEL da gel di agarosio; • Quantificazione del gene HEL e subclonaggio nel vettore di espressione pGEX-4T; • Trasformazione di cellule competenti BL-21 con il plasmide GST-HEL; • Espressione della proteina ricombinante di fusione GST-HEL e analisi mediante SDS-PAGE della proteina ricombinante.
Il Ciclo Cellulare (3 CFU) Strategia generale e fasi del ciclo cellulare: M, G1(G0), S e G2. Sistemi sperimentali per lo studio del ciclo cellulare: uova di Xenopus leavis, cellule di mammifero e lieviti. Regolazione MPF e SPF: cicline mitotiche e G1. Cdks e cicline nel ciclo cellulare dei mammiferi. Punti di controllo del ciclo cellulare. Retinoblastoma ereditario e spontaneo e ruolo di Rb nella regolazione del ciclo cellulare. DNA danneggiato da UV e ruolo di p53. Oncogeni e oncoproteine
(testi)
Elementi di Ingegneria proteica Capitoli selezionati dai seguenti libri: Glick & Pasternak, Biotecnologia Molecolare, Zanichelli Primrose, Twyman & Old, Ingegneria Genetica, Zanichelli Watson, Caudy, Myers & Witkowski, DNA Ricombinante, Zanichelli 2008 (II Edizione) Brown, Biotecnologie molecolari, Zanichelli 2007
Ciclo cellulare Capitoli selezionati dai seguenti libri: Murray A & Hunt T, The cell cycle, an introduction, Oxford University Press, New York. Alberts B, Johnson A, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K & Walter P, Biologia Molecolare della Cellula, Zanichelli, 2016 (VI Edizione) Harvey Lodish, A Berk, C.A. Kaiser, M. Krieger, M.P. Scott, A. Bretscher, P. Ploegh, Paul Matsudaira Biologia Molecolare della Cellula, Zanichelli, 2009 (III edizione)
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