Sicurezza in laboratorio ed allestimento del laboratorio. Concentrazione delle soluzioni, misura del pH delle soluzioni biologiche, preparazione e utilizzo dei tamponi biologici

IL METODO SCIENTIFICO: come si progetta un esperimento di tipo biologico-molecolare e come si ottengono i risultati

OMOGENIZZAZIONE E TECNICHE DI CENTRIFUGAZIONE. Metodi meccanici e fisici per la rottura di cellule e tessuti biologici, centrifughe e ultracentrifughe, tecniche di centrifugazione differenziale e in gradiente di densità

TECNICHE SPETTROSCOPICHE. Lo spettrofotometro e le principali applicazioni della spettrofotometria, analisi quantitative dirette e analisi della concentrazione delle proteine attraverso i saggi colorimetrici, analisi enzimatiche e analisi qualitative. La spettrofluorimetria e l’utilizzo dei fluorofori in applicazioni biologiche.

TECNICHE DI MICROSCOPIA OTTICA E A FLUORESCENZA. Microscopio ottico e a fluorescenza, microscopio confocale, elettronico, a trasmissione e a scansione. Utilizzo dei fissativi e preparazione di campioni istologici e cellulari per la microscopia ottica ed elettronica. Reazioni istochimiche e immunoistochimiche su micro-sezioni di tessuto e trattamenti per la visualizzazione dei componenti cellulari.


INTRODUZIONE ALL’ECOTOSSICOLOGIA. Che cos’è, come nasce e come evolve.
Obiettivi scientifici, tecnici e pratici.

CONTAMINAZIONE ED INQUINAMENTO. Definizioni, approcci per lo studio del destino ambientale dei contaminanti, concetti base di distribuzione ambientale, bioaccumulo, uptake, biotrasformazione, detossificazione, eliminazione e accumulo. Bioconcentrazione e biomagnificazione. Fattori che influenzano il bioaccumulo (persistenza, biodisponibilità, il ruolo delle proprietà chimico-fisiche, reattività ambientale, etc). Coefficienti di ripartizione (1-ottanolo/acqua, aria/acqua, suolo/acqua, organismi/acqua, organismi/aria, aerosol/aria). Approcci predittivi e retrospettivi.

SAGGI ECOTOSSICOLOGICI E BIOMARKERS. Organismi modello nell’ambito della biologia sperimentale e nell’ecotossicologia. Metodi standardizzati (OECD, EPA, ASTM, Unichim), controllo qualità e calcolo dell’EC50. Biomarkers di esposizione e di effetto.

LABORATORIO. Attività sperimentali individuali/in gruppo di laboratorio su specifici casi di studio che prevedono:
Disegno sperimentale, campionamento (prelievo e conservazione di campioni di matrici
ambientali), preparazione del campione, applicazione metodo standardizzato, applicazione di biomarkers.