Docente
|
GUALANDI Giampiero
(programma)
Tecniche ingegneria genetica di base (3cfu) - DNA cromosomico e plasmidico: separazione-purificazione - enzimi per la modifica "in vitro" del DNA -tecniche di analisi di DNA ,RNA: Analisi "southern"," northern". Mappe di restrizione e di delezione. PFGE - Vettori ed ospiti: per genoteche genomiche e di cDNA . - Strategie di selezione dei ricombinanti - Preparazione e marcature delle sonde di DNA, RNA, metodologie di marcatura. - Sistemi di analisi di genoteche (sonde, anticorpi etc.). Genoteche di sottrazione. - Clonaggio per funzionalita', per posizione per "tagging". Analisi e mappatura DNA clonato - Sub-clonaggio. Sequenziamento DNA. - Mappatura dei trascritti. Mappatura regioni regolative - Mutagenesi "in vitro". Oligonucleotidi. - PCR principi e sviluppi particolari. - Applicazioni biotecnologiche Trasferimento genetico (3 cfu) -Analisi e stato del DNA trasferito : PFGE , analisi Southern blot -a) Genetica, clonaggio e modificazione genetica nei funghi: -Mutanti: tipi e selezione; cicli sessuali e parasessuali di lieviti ed aspergilli; complementazione, mappatura, ricombinazione (meccanismi) - trasformazione, vettori: elementi funzionali nei vettori fungini ( ARS, CEN,Telomeri). minicromosomi. YAC, plasmidi - tecniche di trasferimento in lievito," gene disruption", "gene replacement" - tecniche di trasferimento in funghi filamentosi. b) Studio e modificazione genetica di eucarioti superiori: - Colture di cellulari animali. Mutanti e sistemi di selezione. Metodi per la veicolazione del DNA - Virus animali e sviluppo di vettori derivati: SV40, EBV, AAV, retrovirali - Integrazione attraverso ricombinazione illegittima (di genomi virali e vettori derivati) -Sistemi e vettori per il controllo della specificità della ricombinazione (targeting): ricombinazione sito specifica, Crisprs -Animali transgenici -Approcci di terapia genica
(testi)
T.Brown, Biotecnologie molecolari , Zanichelli - S.Kingsman e A.Kingsman, Ingegneria Genetica, Piccin ed. - S.Primerose, R.Twyman,B: Old, Ingegneria Genetica. Zanichelli - Articoli scientifici forniti dal docente
Diapositive al sito https://www.dropbox.com/s/z98dr3zcgj0pxlz/Ing%20Gen%20proc%208.pptx?dl=0
|