Microscopia ottica: principi di funzionamento ed applicazioni. Le tecniche cito-istologiche come metodo diagnostico. Metodi di indagine istochimica. La microscopia ottica a microdissezione laser e sue applicazioni in ambito biomedico. La microiniezione: presentazione e discussione di casi studio. Tecniche di immunoistochimica ed immunofluorescenza su cellule e tessuti: possibili applicazioni in ambito biologico e in particolare nella ricerca biomedica di base ed applicata. Gli anticorpi e le immunolocalizzazioni. Fluorescenza e fluorocromi. Le proteine fluorescenti. Il microscopio a fluorescenza e il microscopio a scansione laser confocale; principi di preservazione dei campioni per la microscopia confocale. Microscopia a due fotoni. Microscopia a super-risoluzione: principi ed applicazioni. Procedure per l’ibridazione in situ su cellule e sezioni di tessuti: principi ed applicazioni. La microscopia elettronica: principi di funzionamento ed applicazioni in ambito diagnostico. Il microscopio elettronico a trasmissione e a scansione: tecniche di preparazione dei campioni. L’immunogold labelling e sue applicazioni in ambito biomedico. Microanalisi elementare del campione: determinazione della presenza e dell'accumulo di sostanze tossiche all'interno di campioni biologici: presentazione e discussione di casi studio. Il microscopio elettronico a scansione ambientale principi ed applicazioni. Immunogold in microscopia elettronica a scansione ambientale: caratteristiche applicative. Microscopia nelle nanotecnologie. Il microscopio a forza atomica: principi e applicazioni in ambito farmacologico. Metodi quantitativi di elaborazione dell’immagine. High Content Analysis. Discussione di lavori scientifici in lingua inglese riguardanti le tematiche e gli approcci metodologici affrontati durante il corso.
Descrizione sintetica delle attività di laboratorio.
Allestimento di vetrini istologici: fissazione, inclusione, taglio al microtomo, colorazione di campioni ed osservazione al microscopio ottico. Reazioni di immunolocalizzazione: la reazione ABC immunoperossidasi. Preparazione di campioni per la microscopia a fluorescenza: osservazione di campioni al microscopio a fluorescenza e al microscopio a scansione laser confocale. Microdissezione laser di campioni biologici. Preparazione di campioni per la microscopia elettronica a trasmissione: fissazione, inclusione, taglio all’ultramicrotomo, contrasto positivo e negativo, ed osservazione al TEM dei campioni. Reazioni di immunolocalizzazione per la microscopia elettronica: preparazione ed osservazione di campioni. Il microscopio elettronico a scansione: preparazione di campioni ed osservazione. Microanalisi elementare del campione: preparazione ed osservazione di campioni in laboratorio. Le esercitazioni verranno svolte presso il laboratorio di zoologia e nei laboratori del CGA.

Articoli scientifici in inglese e slides delle lezioni.